Các nhà khoa học khám phá hiệu quả của thuốc phân tử nhỏ chống lại COVID-19 nghiêm trọng trong ống nghiệm

Trong một nghiên cứu gần đây được đăng trên sinh họcRxiv* máy chủ in sẵn, các nhà nghiên cứu đã đánh giá hiệu quả của các loại thuốc phân tử nhỏ chống lại hội chứng hô hấp cấp tính nặng do vi-rút corona 2 (SARS-CoV-2) trong ống nghiệm.

Nghiên cứu: Xác định các loại thuốc mới để chống lại tình trạng tăng viêm do IgG tăng đột biến gây ra ở bệnh nhân COVID-19 nghiêm trọng.  Tín dụng hình ảnh: MIA Studio/Shutterstock
Nghiên cứu: Xác định các loại thuốc mới để chống lại tình trạng tăng viêm do IgG tăng đột biến gây ra ở bệnh nhân COVID-19 nghiêm trọng. Tín dụng hình ảnh: MIA Studio/Shutterstock

Tiểu sử

Các tác giả của nghiên cứu này trước đây đã chỉ ra rằng các chất chuẩn độ globulin miễn dịch G (IgG) protein kháng SARS-CoV-2 S (tăng đột biến) có liên quan chủ yếu đến các trường hợp nhiễm SARS-CoV-2 nghiêm trọng khi chúng kích hoạt quá trình tăng hoạt động của đại thực bào, phá vỡ tính toàn vẹn của nội mô và gây ra sự hình thành huyết khối. Các phản ứng viêm quá mức được tạo ra phụ thuộc vào hiệu giá của IgG kháng S với quá trình glycosyl hóa vùng đuôi (Fc) đoạn không điển hình. Việc phát triển các loại thuốc có thể chống lại tình trạng siêu viêm do kháng thể gây ra đồng thời giảm thiểu sự ức chế phản ứng miễn dịch chống SARS-CoV-2 có thể mở rộng phạm vi điều trị bệnh do vi-rút corona 2019 (COVID-19).

về nghiên cứu

Trong nghiên cứu hiện tại, các nhà nghiên cứu đã xác định được các chất ức chế phân tử nhỏ chống lại phản ứng tăng viêm do kháng thể gây ra trong các trường hợp nhiễm SARS-CoV-2 nghiêm trọng.

Thử nghiệm kích hoạt đại thực bào, có khả năng đánh giá hiệu quả và hiệu lực của hợp chất chống lại các phản ứng viêm nhắm mục tiêu chống S, đã được phát triển và sử dụng để sàng lọc các phân tử chất ức chế phân tử nhỏ được phép nghiên cứu. Tính chọn lọc và hiệu lực chống lại tình trạng siêu viêm qua trung gian chống S được định lượng dựa trên IC50 (nồng độ ức chế tối đa một nửa) để kích hoạt đại thực bào. M-CSF (yếu tố kích thích khuẩn lạc đại thực bào) và il=10 (interleukin 10) MDAM phân biệt (đại thực bào giống như đại thực bào có nguồn gốc từ bạch cầu đơn nhân) đã được sử dụng. Các phản ứng tiền viêm của đại thực bào được đánh giá dựa trên biểu thức IL-6.

Hiệu quả của thuốc ức chế phân tử nhỏ SYK (spleen-associated tyrosine kinase), entospletinib và R406 (dạng hoạt hóa của fostamatinib) và thuốc ức chế phosphoinositide 3-kinase (PI3K) được so sánh với hiệu quả của dexamethasone. Các chất chuẩn độ IgG kháng S đã được tạo ra, để ủ SARS-CoV-2 S với các mẫu huyết thanh được thu thập từ các bệnh nhân COVID-19 nhập viện tại trung tâm y tế Đại học Amsterdam (UMC) đã bị nhiễm SARS-CoV-2 Vũ Hán- Chủng Hu-1. Huyết thanh được lấy trong quá trình nhập viện đơn vị chăm sóc đặc biệt (ICU). Những phát hiện đã được xác nhận trong ex vivo thí nghiệm BAL (rửa phế quản phế nang) đại thực bào phế nang phổi của con người đã được kích hoạt.

Hơn nữa, HPMVEC (tế bào nội mô mạch máu phổi của con người) đã được điều trị bằng MDAMS đã kích hoạt và điện trở xuyên nội mô của HPMVEC đã được theo dõi. Tác dụng của thuốc phân tử nhỏ mạnh đối với tại chỗ sự hình thành huyết khối đã được thử nghiệm bằng cách thêm tiểu cầu vào các HPMVEC được kích hoạt trung bình trong điều kiện đại thực bào. Độ kết dính tiểu cầu được đánh giá theo yếu tố von Willebrand (vWF)- và các phức hợp miễn dịch IgG nhắm mục tiêu S được hình thành bởi COVA1-18, một mAb tái tổ hợp (kháng thể đơn dòng) cho thấy các chuẩn độ IgG kháng S với quá trình glycosyl hóa không điển hình (78% và 9% galactosyl hóa và Nhóm nghiên cứu đã điều tra các phản ứng siêu viêm gây ra bởi các phức hợp miễn dịch kháng S IgG của nhiều biến thể SARS-CoV-2 đáng lo ngại (VOC) như Alpha, Beta, Gamma và Delta VOC và Vũ Hán-Hu-1 sự căng thẳng.

Kết quả

Nhiều chất ức chế PI3K và SYK chống lại tình trạng viêm qua trung gian các phức hợp miễn dịch chống S. Entospletinib, một chất ức chế SYK, được xác định là ứng cử viên thuốc hứa hẹn nhất để chống lại tình trạng siêu viêm do kháng SARS-CoV-2 S IgG gây ra, phá vỡ tính toàn vẹn của hàng rào nội mô, kết dính tiểu cầu và hình thành huyết khối. Ngoài ra, entospletinib đã ức chế quá trình viêm quá mức qua trung gian kháng S IgG do một số VOC SARS-CoV-2 gây ra. Entospletinib và R406 ngăn chặn quá trình viêm siêu vi chống S hiệu quả hơn dexamethasone.

Entospletinib cho thấy không có tác dụng đối với polyinosinic:axit polycytidylic [poly(I:C)]-Các tế bào đại thực bào được kích hoạt một mình. Các chất ức chế PI3K cần nồng độ cao hơn (vượt quá 10,0 μM) so với các chất ức chế SYK để ức chế 80% chất chống S IL-6 và trong số các chất ức chế PI3K, Alpelisib làm giảm biểu hiện IL-6 một cách mạnh mẽ nhất. Duvelisib, một chất ức chế PI3K-Gamma/Delta làm giảm biểu hiện IL-6 khi đồng kích thích phức hợp miễn dịch kháng S và polyinosinic:axit polycytidylic, phân tử nhỏ tăng cường sản xuất IL-6 theo cách phụ thuộc vào liều trong polyinosinic:axit polycytidylic -điều kiện duy nhất.

Một chất ức chế PI3K-Delta khác idelalisib đối trọng với biểu hiện IL-6 kháng S qua trung gian mà không có tác dụng đối với phản ứng chống SARS-CoV-2. Ở hai nồng độ cao nhất, khả năng sống thấp hơn và tăng cường biểu hiện IL-6 trong điều kiện duy nhất polyinosinic:axit polycytidylic đã được quan sát thấy. Các phát hiện chỉ ra rằng các chất ức chế SYK mạnh hơn các phân tử chất ức chế PI3K. Các chất ức chế PI3K và SYK cho thấy khả năng chống viêm quá mức có chọn lọc hơn so với dexamethasone. Entospletinib và R406 đã ức chế sự biểu hiện anti-S IL-6, làm giảm sự biểu hiện của cytokine đối với nồng độ polyinosinic:axit polycytidylic. Khi kích hoạt các phức hợp miễn dịch có nguồn gốc từ huyết thanh, hai chất ức chế SYK cho thấy có thể so sánh được ex vivotrong ống nghiệm ức chế.

Entospletinib chống lại một cách có chọn lọc các chất trung gian gây tổn thương hàng rào nội mô do đại thực bào tạo ra khi được kích thích bởi SARS-CoV-2 và các phức hợp miễn dịch kháng S có nguồn gốc từ huyết thanh. Các tế bào huyết khối kết dính ở mức độ thấp hơn với các HPMVEC tiếp xúc với môi trường chứa các đại thực bào được xử lý bằng entospletinib dưới tác dụng đồng kích hoạt polyinosinic:axit polycytidylic và huyết thanh. Các phức hợp miễn dịch glycosyl hóa không điển hình đã kết hợp tiểu cầu kết dính với vWF. Entospletinib đối trọng với sự hình thành huyết khối gia tăng và giảm thể tích huyết khối so với các biện pháp kiểm soát COVA1-18 mAb. Entospletinib và R406 đã giảm biểu hiện IL-6 từ 75% đến 95% so với tất cả các VOC.

Nhìn chung, các kết quả nghiên cứu cho thấy phong tỏa tín hiệu SYK là một chiến lược hiệu quả để chống lại sự tăng hoạt động của các đại thực bào phế nang gây ra bởi các phức hợp miễn dịch có nguồn gốc từ huyết thanh. Entospletinib được phát hiện là chất ức chế SYK hứa hẹn nhất chống lại COVID-19 nghiêm trọng.

*Thông báo quan trọng

bioRxiv xuất bản các báo cáo khoa học sơ bộ không được đánh giá ngang hàng và do đó, không nên được coi là kết luận, hướng dẫn thực hành lâm sàng/hành vi liên quan đến sức khỏe hoặc được coi là thông tin đã được thiết lập.

Tạp chí tham khảo:
  • Chiara E. Geyer và cộng sự. (2022). Xác định các loại thuốc mới để chống lại tình trạng tăng viêm do kháng IgG tăng đột biến trong COVID-19 nghiêm trọng. sinh họcRxiv. làm: https://doi.org/10.1101/2022.12.20.521247 https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2022.12.20.521247v1

Source link

Leave a Reply

Your email address will not be published.